Profilo fitochimico e di bioattività di droghe ayurvediche: Boerhaavia diffusa e Curculigo orchioides

L'Ayurveda, medicina tradizionale indiana, è oggi riconosciuta dall'Unione Europea tra le medicine non convenzionali e annovera più di 7000 piante utilizzate a scopo terapeutico in complesse formulazioni scarsamente indagate sotto il profilo chimico e di bioattività1. In particolare la standardizzazione di una droga o di un suo estratto, attraverso anche la scelta di opportuni marker che ne qualifichino la qualità, rappresenta uno dei punti cruciali per poterne validare la sicurezza e l'efficacia2. Su questi presupposti e nell'ambito di una progettualità di più ampio respiro (PRIN 2009LR9YLF) sono state indagate, attraverso una strategia bioassay-guided, le preparazioni ayurvediche decotto di Boerhaavia diffusa L. (Nyctaginaceae) radice e di Curculigo orchioides Gaertn. (Hypoxidaceae) radice, e confrontate con le tinture madri, tipiche della medicina occidentale. In particolare nel decotto di B. diffusa sono state identificate e quantificate, mediante GC-MS e GC-FID, β-sitosterolo (2,500±0,342 μg/ml) e stigmasterolo (0,220±0,009 μg/ml), in RP-HPLC-DAD, acido ferulico (6,803±0,022 μg/ml) e vanillina (1,833±1,387 μg/ml); per la tintura madre anche eupalitin e boeravinone B. Nel decotto di C. orchioides sono state titolate: β-sitosterolo (0,281±0,003 μg/ml), stigmasterolo (0,029±0,001 μg/ml), curculigoside A (7,192±1,433 μg/ml) e orcinol-β-D-glucoside (72,932±0,429 μg/ml). Con il DPPH e ABTS autobiographic assay e i test spettrofotometrici ABTS, DPPH, β-carotene bleaching si è saggiata l'attività antiossidante delle preparazioni tradizionali e delle molecole in esse contenute. Il test più performante, ABTS, ha mostrato valori di IC50 pari a 150,794±6,241 µg/ml per il decotto di B. diffusa e 46,895±1,643 µg/ml per quello di C. orchioides. Le tinture madri sono risultate più attive, con valori di 33,272±3,406 µg/ml per B. diffusa e 4,435±0,090 µg/ml per C. orchioides. Tra le molecole pure saggiate, le più attive sono state acido ferulico (1,081±0,043 µg/ml) ed eupalitin (4,402±0,002 µg/ml) per B. diffusa, curculigoside A (4,752±0,197 µg/ml) e orcinol-β-D-glucoside (4,900±0,011 µg/ml) per C. orchioides, confrontate con l'antiossidante di sintesi trolox (2,040±0,101 µg/ml). Con SOS Chromotest è stata verificata la sicurezza d'uso delle preparazioni tradizionali ed è stata indagata la loro azione mutageno protettiva con l'ausilio di un controllo positivo (2-idrossi-4-metossibenzaldeide) ed uno negativo (4-nitro-N-ossi-chinolina). Risultati interessanti sono stati ottenuti solo per i fitocomplessi di C. orchioides (più efficace il decotto della tintura madre). Tra le molecole pure testate curculigoside A (29,81±1,50% inibizione massima a 296,875 µg/ml) e orcinol-β-D-glucoside (24,52±1,21% inibizione massima a 343,750 µg/ml) hanno presentato la maggiore attività, contribuendo a spiegare i risultati ottenuti per le preparazioni tradizionali di C. orchioides. Nel caso di B. diffusa, boeravinone B (alle concentrazioni più basse: 24,53±1,05% inibizione massima a 531,250 µg/ml), acido ferulico (36,03±1,81% inibizione massima a 3200 µg/ml) e vanillina (30,57±1,39% inibizione massima a 400 µg/ml) hanno mostrato una lieve attività mutageno protettiva, che non si riflette nei dati ottenuti con le preparazioni tradizionali. In conclusione questo lavoro presenta un primo tentativo di individuazione e quantificazione di marker specifici per le preparazioni ayurvediche di B. diffusa e C. orchioides e risultati preliminari di bioattività che vanno nella direzione di confermare l'uso tradizionale di queste droghe nella disciplina ayurvedica Rasayana, paragonabile, nella medicina occidentale, ad una medicina preventiva3.